ELISA直接法
在ELISA直接法中，樣品中的抗原或抗體以非特異性方式直接吸附在包被板上。然后，將特異性測(cè)定抗體或抗原連接到孔中。之后，測(cè)定底物被用來(lái)產(chǎn)生可測(cè)量的顏色變化，并在讀板器上進(jìn)行量化。

由于這種檢測(cè)方法步驟少，速度快，而且比其他ELISA方法更少有機(jī)會(huì)引入錯(cuò)誤。然而，由于吸附步驟是非特異性的，背景噪音可能很高。沒(méi)有二級(jí)抗體步驟意味著沒(méi)有信號(hào)放大，降低了檢測(cè)靈敏度。它還需要為每個(gè)所需目標(biāo)創(chuàng)建共軛測(cè)定抗體/抗原。

ELISA間接法
ELISA間接法，或稱iELISA，最初于1978年開發(fā)，用于檢測(cè)人血清白蛋白，其工作方式與ELISA直接法非常相似，只是增加了一個(gè)二級(jí)抗體步驟。這使得測(cè)試信號(hào)得到放大，克服了ELISA直接法的局限性。

它還否定了對(duì)目標(biāo)特異性共軛測(cè)定抗體/抗原的需要，因?yàn)楣曹椀亩?jí)抗體只需要對(duì)一級(jí)抗體具有物種特異性。如果總的樣品抗原被結(jié)合到包被板上，就像ELISA直接法一樣，背景噪音仍然是一個(gè)問(wèn)題。

然而，如果該檢測(cè)方法用于檢測(cè)樣品抗體，純化的目標(biāo)抗原被涂在板上，而一級(jí)抗體來(lái)自于樣品。這大大減少了背景噪音，因此這些檢測(cè)方法在確定樣品中的抗體滴度時(shí)最受歡迎。

ELISA間接法的缺點(diǎn)包括方案時(shí)間較長(zhǎng)，有更多出錯(cuò)機(jī)會(huì)，以及可能與二級(jí)抗體產(chǎn)生交叉反應(yīng)。

ELISA夾心法
顧名思義，ELISA夾心法將抗原夾在抗體之間，該技術(shù)開發(fā)于1977年[6]，可以采用ELISA直接或間接法的形式（上面描述的ELISA夾心法是基于ELISA間接法），除了抗原與檢測(cè)板的非特異性結(jié)合，捕獲抗體使其成為一個(gè)特異性的過(guò)程。這種組合進(jìn)一步提高了檢測(cè)的靈敏度和特異性。

然而，它們確實(shí)需要確定兼容的捕獲和測(cè)定抗體對(duì)才能有效地發(fā)揮作用，而且可能有交叉反應(yīng)的問(wèn)題。這種檢測(cè)方法通常也有最多的步驟，提供了更大的出錯(cuò)機(jī)會(huì)。由于抗原結(jié)合步驟的選擇性，ELISA夾心法在抗原處于復(fù)雜混合狀態(tài)時(shí)特別有用，因?yàn)椴恍枰兓乖?/p>

ELISA競(jìng)爭(zhēng)法
ELISA競(jìng)爭(zhēng)法，也被稱為ELISA抑制法或ELISA阻斷法，可能是ELISA技術(shù)中最復(fù)雜的一種。

最初是在1976年[7]為檢測(cè)人類絨毛膜促性腺激素而開發(fā)的，該檢測(cè)方法通過(guò)檢測(cè)對(duì)預(yù)期輸出信號(hào)水平的干擾，產(chǎn)生一個(gè)反比關(guān)系。應(yīng)用的樣品中目標(biāo)物越多，測(cè)定的輸出信號(hào)就越低。

其他ELISA方法也可以被改變?yōu)楦?jìng)爭(zhēng)法。這里有兩個(gè)一般的原則：樣品抗原或抗體與參照物競(jìng)爭(zhēng)，分別與有限數(shù)量的標(biāo)記抗體或抗原結(jié)合；又或者，樣品抗原或抗體可以與標(biāo)記參照物競(jìng)爭(zhēng)，分別與有限數(shù)量的抗體或抗原結(jié)合。

ELISA競(jìng)爭(zhēng)法與它所采用的形式一樣，具有一些相同的優(yōu)點(diǎn)和缺點(diǎn)。然而，當(dāng)抗原較小，限制了兩個(gè)抗體同時(shí)結(jié)合的能力（如ELISA夾心法所要求的），或者只有一個(gè)抗體可用時(shí)，它的作用就凸顯了出來(lái)。

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