2025/03/13
胰蛋白酶在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用機(jī)制是怎樣的？
胰蛋白酶是一種消化酶，存在于胰液中，能分解蛋白質(zhì)，在細(xì)胞培養(yǎng)中用于通過消化粘附蛋白從表面釋放貼壁細(xì)胞或從聚集體中釋放單個細(xì)胞，常與EDTA聯(lián)合使用以螯合二價離子如鈣和鎂，從而增強(qiáng)其作用效果，有助于細(xì)胞的分離和下游處理。
胰蛋白酶是一種消化酶，存在于胰液中，能分解蛋白質(zhì)，在細(xì)胞培養(yǎng)中用于通過消化粘附蛋白從表面釋放貼壁細(xì)胞或從聚集體中釋放單個細(xì)胞，常與EDTA聯(lián)合使用以螯合二價離子如鈣和鎂，從而增強(qiáng)其作用效果，有助于細(xì)胞的分離和下游處理。
2025/03/13
N2添加劑的運(yùn)用方式
N2添加劑基于Bottenstein's N-1配方，是一種化學(xué)成分明確的無血清添加劑，適用于支持多種神經(jīng)細(xì)胞的生產(chǎn)和表達(dá)。它以100X濃縮液形式提供，可與Neurobasal或DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合使用。使用時需將100X濃縮液稀釋至1X，配制好的培養(yǎng)基在2-8℃下避光保存可達(dá)兩周。
N2添加劑基于Bottenstein's N-1配方，是一種化學(xué)成分明確的無血清添加劑，適用于支持多種神經(jīng)細(xì)胞的生產(chǎn)和表達(dá)。它以100X濃縮液形式提供，可與Neurobasal或DMEM基礎(chǔ)培養(yǎng)基混合使用。使用時需將100X濃縮液稀釋至1X，配制好的培養(yǎng)基在2-8℃下避光保存可達(dá)兩周。
2025/03/12
在培養(yǎng)微生物的過程中，為何要將培養(yǎng)皿倒置放置？
倒置培養(yǎng)皿可減緩水分蒸發(fā)、避免污染、方便取用和觀察，同時有助于收集代謝物、避免培養(yǎng)基龜裂，適用于多種實(shí)驗(yàn)需求，提升操作便利性和結(jié)果準(zhǔn)確性。
倒置培養(yǎng)皿可減緩水分蒸發(fā)、避免污染、方便取用和觀察，同時有助于收集代謝物、避免培養(yǎng)基龜裂，適用于多種實(shí)驗(yàn)需求，提升操作便利性和結(jié)果準(zhǔn)確性。
2025/03/12
常見培養(yǎng)基的特點(diǎn)
BME、MEM、DMEM、IMDM和RPMI-1640是常用的細(xì)胞培養(yǎng)基。BME由Eagle設(shè)計，適于傳代細(xì)胞系和特殊研究；MEM在其基礎(chǔ)上改進(jìn)，適合多種細(xì)胞單層生長，應(yīng)用廣泛；DMEM氨基酸和維生素濃度更高，分為低糖和高糖，適應(yīng)不同細(xì)胞需求；IMDM富含營養(yǎng)，支持多種細(xì)胞增殖；RPMI-1640專為淋巴細(xì)胞設(shè)計，也適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。這些培養(yǎng)基各有特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究和生產(chǎn)中。
BME、MEM、DMEM、IMDM和RPMI-1640是常用的細(xì)胞培養(yǎng)基。BME由Eagle設(shè)計，適于傳代細(xì)胞系和特殊研究；MEM在其基礎(chǔ)上改進(jìn)，適合多種細(xì)胞單層生長，應(yīng)用廣泛；DMEM氨基酸和維生素濃度更高，分為低糖和高糖，適應(yīng)不同細(xì)胞需求；IMDM富含營養(yǎng)，支持多種細(xì)胞增殖；RPMI-1640專為淋巴細(xì)胞設(shè)計，也適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)。這些培養(yǎng)基各有特點(diǎn)，廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)研究和生產(chǎn)中。
2025/03/11
弗氏佐劑堪稱抗體制備過程中的得力助手
弗氏佐劑由Jules Freund發(fā)明于20世紀(jì)40年代，是動物實(shí)驗(yàn)中最常用的免疫佐劑，用于制備抗體。它通過使抗原緩慢釋放并增強(qiáng)機(jī)體的特異性免疫應(yīng)答來提高免疫原性。弗氏佐劑分為完全佐劑和不完全佐劑，前者在后者基礎(chǔ)上添加了結(jié)核分枝桿菌，增強(qiáng)免疫反應(yīng)能力，但通常用于初次免疫以避免副作用。這兩種佐劑具有安全低毒、免疫效果好的特點(diǎn)。
弗氏佐劑由Jules Freund發(fā)明于20世紀(jì)40年代，是動物實(shí)驗(yàn)中最常用的免疫佐劑，用于制備抗體。它通過使抗原緩慢釋放并增強(qiáng)機(jī)體的特異性免疫應(yīng)答來提高免疫原性。弗氏佐劑分為完全佐劑和不完全佐劑，前者在后者基礎(chǔ)上添加了結(jié)核分枝桿菌，增強(qiáng)免疫反應(yīng)能力，但通常用于初次免疫以避免副作用。這兩種佐劑具有安全低毒、免疫效果好的特點(diǎn)。
2025/03/11
怎樣選擇適合的ELISA試劑盒
本文介紹了實(shí)驗(yàn)?zāi)康膮^(qū)分及選擇ELISA試劑盒的方法。首先，明確實(shí)驗(yàn)是針對靶標(biāo)功能性測定還是含量檢測。接著，根據(jù)研究對象（蛋白質(zhì)或多肽、小分子半抗原）查詢相關(guān)ID（Uniprot ID或CAS號）。還需預(yù)判靶標(biāo)在樣本中的含量，并選擇靈敏度足夠的試劑盒。最后，比較不同品牌試劑盒的性能參數(shù)，如靈敏度、特異性等，以確保實(shí)驗(yàn)的有效性和可信度。
本文介紹了實(shí)驗(yàn)?zāi)康膮^(qū)分及選擇ELISA試劑盒的方法。首先，明確實(shí)驗(yàn)是針對靶標(biāo)功能性測定還是含量檢測。接著，根據(jù)研究對象（蛋白質(zhì)或多肽、小分子半抗原）查詢相關(guān)ID（Uniprot ID或CAS號）。還需預(yù)判靶標(biāo)在樣本中的含量，并選擇靈敏度足夠的試劑盒。最后，比較不同品牌試劑盒的性能參數(shù)，如靈敏度、特異性等，以確保實(shí)驗(yàn)的有效性和可信度。
2025/03/10
蛋白酶K的作用機(jī)制及其應(yīng)用
新型蛋白酶K源自林伯氏白色念球菌的基因，通過基因定點(diǎn)突變、酵母細(xì)胞分泌表達(dá)及色譜純化技術(shù)優(yōu)化，提高了比活性和純度，并去除了細(xì)菌內(nèi)毒素。該酶在pH 4到pH 12和0～75ºC條件下均有活性，且在常用濃度的SDS、尿素或EDTA中穩(wěn)定。它可切割脂肪族和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵，適用于各種蛋白質(zhì)降解。目前主要用于基因診斷試劑盒、基因組DNA提取試劑盒和RNA提取試劑盒中去除核酸酶和其他蛋白污染，還廣泛應(yīng)用于工業(yè)提取非蛋白類生物制品如核酸、多糖類藥物，以及皮膚保健等領(lǐng)域。
新型蛋白酶K源自林伯氏白色念球菌的基因，通過基因定點(diǎn)突變、酵母細(xì)胞分泌表達(dá)及色譜純化技術(shù)優(yōu)化，提高了比活性和純度，并去除了細(xì)菌內(nèi)毒素。該酶在pH 4到pH 12和0～75ºC條件下均有活性，且在常用濃度的SDS、尿素或EDTA中穩(wěn)定。它可切割脂肪族和芳香族氨基酸的羧基端肽鍵，適用于各種蛋白質(zhì)降解。目前主要用于基因診斷試劑盒、基因組DNA提取試劑盒和RNA提取試劑盒中去除核酸酶和其他蛋白污染，還廣泛應(yīng)用于工業(yè)提取非蛋白類生物制品如核酸、多糖類藥物，以及皮膚保健等領(lǐng)域。
2025/03/10
重組蛋白可以分為哪些類型？
重組蛋白通過重組DNA或RNA技術(shù)獲得，體外生產(chǎn)主要包括原核、哺乳動物細(xì)胞、酵母及昆蟲細(xì)胞四大系統(tǒng)。根據(jù)用途選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)可提高成功率。重組蛋白按功能分為白細(xì)胞介素（IL）、干擾素（IFN）、腫瘤壞死因子（TNF）、集落刺激因子（CSF）、生長因子（GF）及趨化性細(xì)胞因子（chemokine）。這些蛋白在免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖等方面發(fā)揮重要作用。
重組蛋白通過重組DNA或RNA技術(shù)獲得，體外生產(chǎn)主要包括原核、哺乳動物細(xì)胞、酵母及昆蟲細(xì)胞四大系統(tǒng)。根據(jù)用途選擇合適的表達(dá)系統(tǒng)可提高成功率。重組蛋白按功能分為白細(xì)胞介素（IL）、干擾素（IFN）、腫瘤壞死因子（TNF）、集落刺激因子（CSF）、生長因子（GF）及趨化性細(xì)胞因子（chemokine）。這些蛋白在免疫調(diào)節(jié)、細(xì)胞增殖等方面發(fā)揮重要作用。
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